【目的】掌握显微镜的操作规程;了解光学显微镜的结构及原理;了解显微镜的保养方法。掌握临时水封片的制作。

　　【用品】显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、吸管、吸水纸。

　　【材料】松(Pinus)茎横切永久制片、含绿藻的水、写有“上”字的小纸片。

　　【内容及方法】一、显微镜的结构光学显微镜(以下简称为显微镜)，是用来观察肉眼看不见的微小生物结构的。虽然电子显微镜已经问世，但是，在目前一般的科学研究和教学中，显微镜仍然是重要的、较为精密的生物观察仪器。为了正确操作、妥善保管和维护显微镜，使之延长使用年限，作为生物学工作者，必须了解显微镜的结构和功能。

　　MoticB1-220ASC型显微镜外形结构图一架显微镜包括光学系统和机械装置两大部分

　　(一)机械部分

　　1.镜筒是一个金属长筒，筒口上端安装目镜镜头，下端装有镜头转换器和物镜镜头。

　　2.镜头转换器是安装在镜简下端的一个旋转圆盘。镜头转换器上有3--5个孔，分别装有低倍或高倍物镜镜头。

　　3.粗准焦螺旋位于镜臂的下方，可以转动，以便使载物台能上下移动，从而调节焦距。

　　4.细准焦螺旋位于粗准焦螺旋外方，它的移动范围较粗准焦螺旋小，可以细调焦距。

　　5.镜座位于镜臂下方，用以稳固和支持镜身。

　　6.镜臂上接镜筒，下连载物台，呈弓曲形。为显微镜上的手握之处。

　　7.载物台是放置玻片的平台。其中央具有通光孔，载物台上有金属夹片夹，是用来卡住载玻片的夹子，转动左、右移动尺螺旋还可使切片在载物台上移动。

　　(二)光学部分

　　1.目镜是插在镜筒顶部的镜头，是由一组透镜组成的，它可以使物镜成倍地分辨、放大物像，例如5×、10×、15×和20×。

　　2.物镜安装在物镜转换器的孔上，也是由一组透镜组成的，能够把物体清晰地放大。物镜上刻有放大倍数，例如(4、10、25、40、100×)等。显微镜的放大倍数是目镜倍数乘以物镜的倍数。

　　3.底光源位于底座上，开关位于底座侧方。光线的强度可以调节。

　　4.在镜柱前有一个聚光器调节螺旋，它可以使聚光器升降，用以调节光线的强弱，下降时明亮度降低，上升时明亮度加强。

　　5.虹彩光圈又称可变光阑，由多数金属片组成，在较高级显微镜上具有此装置。使用时移动其把柄，可控制聚光器透镜的通光范围，用以调节光的强度。虹彩光圈下常附有金属圈，其上装有滤光片，可调节光源的色调。

　　二、显微镜的使用规程

　　(一)实验时要把显微镜放在桌面上，镜座应距桌沿6～7cm左右，打开底光源开关。(二)转动转换器，使低倍镜头正对载物台上的通光孔。然后用双眼注视目镜内，调整光源强度，把聚光镜上升，把虹彩光圈调至最大，使光线反射到镜简内，这时视野内呈明亮的状态。

　　(三)将所要观察的装片放在载物台上，使被观察的部分位于通光孔的正中央。

　　(四)先用低倍镜观察(物镜10×、目镜10×)。观察之前，先转动粗准焦螺旋，使载物台上升，使物镜逐渐接近切片。需要注意，不能使物镜触及玻片，以防镜头将玻片压碎。并转动粗准焦螺旋，使载物台慢慢下降，不久即可看到玻片中材料的放大物像。(五)如果在视野内看到的物像不符合实验要求(物像偏离视野)，可慢慢移动左右移动尺。移动时应注意玻片移动的方向与视野中看到的物像移动的方向正好相反。如果物像不甚清晰，可以调节细准焦螺旋，直至物像清晰为止。

　　(六)如果进一步使用高倍物镜观察，应在转换高倍物镜之前，把物像中需要放大观察的部分移至视野中央(将低倍物镜转换成高倍物镜观察时，视野中的物像范围缩小了很多)。一般具有正常功能的显微镜，低倍物镜和高倍物镜基本齐焦，在用低倍物镜观察清晰时，换高信物镜应该可以见到物像，但物像不一定很清晰，可以转动细准焦螺旋进行调节。

　　(七)在转换高倍物镜并且看清物像之后，可以根据需要调节光圈或聚光器，使光线符合要求(一般将低倍物镜换成高倍物镜观察时，视野要稍变暗一些，所以需要调节光线强弱)。

　　(八)观察完毕，应先将物镜镜头从通光孔处移开，然后将显微镜复原。并检查零件有无损伤(特别要注意检查物镜是否沾水，如沾了水要用镜头纸擦净)，检查处理完毕后即可放回原处。

　　三、显微镜的维护

　　1.必须熟练掌握并严格执行使用规程。

　　2.取送显微镜时一定要一手握住镜臂，另一手托住底座。显微镜不能倾斜，以免目镜从镜筒上端滑出。取送显微镜时要轻拿轻放。

　　3.观察时，不能随便移动显微镜的位置。

　　4.凡是显微镜的光学部分，只能用特殊的擦镜头纸擦拭，不能乱用他物擦拭，更不能用手指触摸透镜，以免汗液玷污透镜。

　　5.保持显微镜的清洁，避免灰尘、水及化学试剂的玷污。

　　6.转换物镜镜头时，不要搬动物镜镜头，应转动转换器。

　　7.切勿随意转动粗准焦螺旋。使用细准焦螺旋时，用力要轻，转动要慢，转不动时不要硬转。

　　8.不得任意拆卸显微镜上的零件，严禁随意拆卸物镜镜头，以免损伤转换器螺口，或螺口松动后使低高倍物镜转换时不齐焦。

　　9.在使用高倍物镜时，不要用粗准焦螺旋调节焦距，以免移动距离过大，损伤物镜和玻片。

　　10.保持显微镜的干燥。

　　11.用毕后，必须检查物镜镜头上是否沾有水或试剂，如有则要擦拭干净，并且要把载物台擦拭干净，按规定放好。

　　四、显微标本的观察

　　1、取松茎横切片做低倍及高倍镜检。

　　2、取写有“上”字的纸片做低倍及高倍镜检。

　　3、用吸管吸取一滴含绿藻的水，滴一滴在干净的载片上，加上盖片，加盖片的方法是盖片一边与载片接触，然后慢慢盖上，突然放下盖片将会产生气泡，影响观察效果。然后置于显微镜下做低倍及高倍镜检。

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